林可霉素利多卡因凝胶又被称作绿药膏，主要成分为利多卡因和林可霉素，在民间广泛应用于蚊虫叮咬和各种皮肤烧伤感染，疗效显著。但是现行的国家标准化学药品地标升国标中只规定了林可霉素的HPLC含量测定方法，并未对利多卡因和有关杂质的含量测定方法作出说明[1]。而2015版《中国药典》只对利多卡因凝胶的含量测定方法做出了说明，并未收录林可霉素利多卡因凝胶[2]。国内缺少同时测定林可霉素利多卡因凝胶两个主要成分的标准方法，并且尚未见测定有关物质含量的方法。因此，本文参照已报道的相关文献[3-5]，采用对照品法对已知杂质进行定性和定量，建立了林可霉素利多卡因凝胶中2个主成分及有关物质含量测定方法，确定了有关物质2，6-二甲基苯胺。本论文建立的方法可以有效分离各主成分和杂质，对国内林可霉素利多卡因凝胶生产可以提供质量控制参考。

1 仪器和试剂

1.1 仪器：Agilent 1260 Infinity高效液相色谱仪（DAD氘灯检测器，美国 Agilent），色谱柱 Waters C18Sunfire（250 mm×4.6 mm，5 μm），ML-S电子天平（瑞士梅特勒-托利多），甲醇、乙腈和三氟乙酸均来自德国Merk。

1.2 试剂：林可霉素利多卡因凝胶由山西中医药大学附属中西结合医院提供（购自某药厂三个批次20170301、20170322、20170430，每克含有林可霉素5 mg、利多卡因4 mg），利多卡因对照品（中国食品药品检定研究院，批号：100341-200702），林可霉素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：130432-200908，纯度≥86%），2，6-二甲基苯胺对照品（中国药品生物制品检定所，批号：100868-201202，纯度≥99%），甲醇（Merck）、三氟乙酸（TEDID）为色谱纯，磷酸二氢钾为分析纯（国药集团化学试剂有限公司），水为Milli-Q超纯水。

按照 《国务院关于批转财政部权责发生制政府综合财务报告制度改革方案的通知》和《预算法》提出按年度编制以权责发生制为基础的政府综合财务报告的要求，财政部于2017年10月印发了《关于印发〈政府会计制度——行政事业单位会计科目和报表〉的通知》，要求行政事业单位于2019年1月开始施行，并且规定执行《政府会计制度》的单位，不再执行行业会计制度。因此，高等学校执行《政府会计制度》势在必行。鉴于此，笔者从《政府会计制度》的创新入手，提出高等学校在应用《政府会计制度》过程中应注意和解决的问题。

2 方法与结果

2.1 色谱条件：色谱柱：Waters C18Sunfire（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相：0.05 M硼砂-0.01%三氟乙酸-水：甲醇：乙腈（70∶10∶20），检测波长：210 nm，流速：1.0 mL/min，柱温：40 ℃，进样量：10 μL，洗脱时间：30 min。

2.2.1 对照品溶液储备液：精密称取林可霉素对照品100.0 mg、利多卡因对照品50.0 mg、2，6-二甲基苯胺对照品各50.0 mg，分别置于100 mL容量瓶中，加流动相定容至刻度，摇匀，即得浓度为1 mg/mL的林可霉素、0.5 mg/mL的利多卡因对照品溶液储备液。

2.2.2 对照品混合溶液：精密称取林可霉素对照品溶液储备液、利多卡因对照品溶液储备液、2，6-二甲基苯胺对照品储备液各5.0 mL分别置于10 mL容量瓶中，加流动相定容至刻度，摇匀，即得浓度为500 μg/mL的林可霉素、250 μg/mL的利多卡因和2，6 -二甲基苯胺对照品溶液。

在生活面前，没有胜利者。有时候，做一个糊涂之人，或许更幸福。傻姑的眼神里，就有一种儿童般的单纯。此刻，范坚强动了恻隐之心，更坚定了要把她送救助站的决定。但傻姑却不见了。范坚强偏头上了车，慢慢往前开去，仔细搜寻着街道两边。傻姑钻进了路边一个垃圾筒，蹲下去，把垃圾拣起来，看一看，一些夹在左手腋窝下，一些又随手扔掉了。范坚强把车停在路边，看着傻姑，心想，在我们的眼里，她的世界是肮脏的，不知道在她的眼里，我们的世界又是怎样的？

江西财政在扶贫工作中坚持按照“核心是精准、关键在落实、确保可持续”的要求，加大扶贫资金投入，将扶贫资金聚焦重点难点，“实“扶贫，“真”结果。去年一年，江西省精准扶贫工作成绩斐然，实现50万人脱贫、1000个贫困村退出、6个贫困县达到摘帽条件，贫困人口减至90万人以下。

2.2 溶液的配制

2.6 检测限和定量限：取混合对照品溶液，稀释，依次进样，记录峰面积，计算信噪比。以3倍信噪比确定检测限，林可霉素、利多卡因和2，6-二甲基苯胺的检测限分别为40 ppb、20 ppb、20 ppb；以10倍信噪比确定定量限，林可霉素、利多卡因、2，6-二甲基苯胺的定量限分别为80 ppb、40 ppb、40 ppb。

2.2.4 供试品溶液：取供试品溶液2.0 g，置50 mL容量瓶中，精密称重，加流动相定容至刻度，摇匀，再取1.0 mL置5 mL容量瓶中，加流动相定容至刻度，摇匀，经0.22 μm滤膜过滤，分别进样。

2.4 稳定性试验：分别于对照品溶液配制后24 h内不同时间点取溶液进样检测，试验结果表明，杂质未出现，非常稳定，未发现杂质增多趋势，符合要求。

2.3 系统适用性试验：取混合对照品溶液，按照“2.1”项下色谱条件连续进样6次，记录峰面积，计算峰面积的RSD、理论塔板数及分离度。林可霉素、利多卡因和2，6-二甲基苯胺峰面积的RSD分别为1.2%、1.0%、0.6%，理论塔板数均符合大于2000的要求，分离度均达到大于1.5的要求。

91%以上的学生认为PBL教学法提高了思维和解决问题能力、归纳总结与表达能力；80%以上的学生认为PBL教学法提高了学习热情、兴趣和积极性，且在自学能力、创新精神培养与交流互动等方面取得了较好的效果；70%以上的学生喜欢PBL教学法并认为课堂教学生动有趣、对所学内容理解透彻且有助于理论联系实际，也有利于知识、经验和技能的应用（见表1）。访谈结果也证实，很多学生认为PBL教学法新颖有趣，能更好地帮助自身理解和掌握所学知识并将它们运用于现实生活中。同时，也有部分学生认为教师如能提供更多帮助和指导会更好。

2.5 精密度试验：取混合对照品溶液连续进样（n=6），记录峰面积，计算峰面积的RSD。结果表明，林可霉素、利多卡因和2，6-二甲基苯胺峰面积的RSD分别为1.3%、1.1%、1.3%，符合要求。

2.2.3 林可霉素和利多卡因对照品溶液：取林可霉素和利多卡因对照品溶液储备液各5.0 mL置50 mL容量瓶中，加流动相定容至刻度，摇匀。

2.7 杂质线性及范围：取对照品混合溶液，用流动相稀释到含有2，6-二甲基苯胺和利多卡因 50 μg/mL、30 μg/mL、20 μg/mL、10 μg/mL、5.0 μg/mL，含有林可霉素 200 μg/mL、150 μg/mL、100 μg/mL、50 μg/mL、25.0 μg/mL 的溶液，分别进样检测，记录峰面积，以峰面积为y纵坐标，以浓度x为横坐标，计算回归方程。2，6-二甲基苯胺和利多卡因在5.0～50 μg/mL范围内线性良好，回归方程分别为 133.27x-5.67（R2=0.9999）、y=59.09x-10.771（R2=0.9999），林可霉素在25～200 μg/mL范围内线性关系良好，回归方程为 y=210.04x-5.087（R2=0.9998）。

2.8 回收率试验：取已知主药含量和有关物质含量的样品（批号：20170322）适量，共6份，产品规格为15 g，分别按下表加入一定量的标准品，按照“2.2.4”项下的方法制备供试品溶液，按“2.1”项下的色谱条件进样，记录色谱图，计算平均回收率和RSD值。结果表明，回收率介于90%～110%之间，符合要求。

2.9 样品的含量及有关物质检测：取3个批次的样品（批号：20170301、20170322、20140430）适量，按照“2.2.4”项下的方法制备供试品溶液，按“2.1”项下的色谱条件进样，记录色谱图，根据峰面积计算含量，见表4。

3 讨论

3.1 流动相的选择：考察流动相体系时，采用简单的乙腈-水和甲醇-水体系并不能将3个化合物分离。根据2015版药典的利多卡因和2，6-二甲基苯胺的检测方法采用磷酸盐缓冲液，发现林可霉素的峰型不好。后根据文献欧阳晓玫[3]、张菁[6]、易文琳[7]报道的色谱体系，均无法很好地分离3个化合物。经试验选择以A：0.05 M硼砂-0.01%三氟乙酸-水；流动相B：甲醇；流动相C：乙腈，流动相 A-流动相-B：流动相 C（70∶10∶20）为流动相，可以把三种物质有效分离。

3.2 检测波长的选择：林可霉素在214 nm处有最大吸收，盐酸利多卡因和2，6-二甲基苯胺为末端吸收，为同时检测3个化合物，选择检测波长为210 nm。

汉文学-讲师为三岛毅。轮流阅读《左传》、《荀子》、《扬子》、《法言》(译者按：《东洋大学百年史》所作“《扬子》、《法言》”应作“《扬子法言》”)等。

3.3 色谱柱和柱温的选择：该方法主要选择的是Waters C18Sunfire色谱柱，同时，我们还使用了Agilent Eclipse Plus C18色谱柱，结果也能很好地分离。更换柱温为30℃，其他条件保持不变，各峰均能很好地分离。结果显示，本方法可同时测量林可霉素利多卡因凝胶中的有关物质含量，该方法简单，结果可靠，可为林可霉素利多卡因凝胶的质量方法建立提供参考。

参考文献

[1]化学药地标升国际专项工作小组.化学药品地方标准上升国家标准（第一批）品种名单[J].中国药品标准，2002，3（5）：16-18.

[2]Ch.P（2015）VolⅡ（中国药典2010年版.二部）[S].2015.

[3]欧阳晓玫，牟建平，滕宝霞，等.高效液相色谱法测定林可霉素利多卡因凝胶中盐酸利多卡因含量 [J].分析测试技术与仪器，2019，25（1）：39-43.

[4]周雅茹，查佳明，荆志欣，等.利多卡因气雾剂有关物质的HPLC 法测定[J].药物分析杂志，2018，12（3）：469-476.

[5]高婷，赵玉娜，何艳萍，等.HPLC法测定消炎润麻胶浆中盐酸利多卡因的含量及其稳定性研究[J].宁夏医科大学学报，2017，（3）：358-361.

[6]张菁，常旸，朱建平，等.HPLC法同时测定盐酸林可霉素滴眼液中有关物质和防腐剂含量[J].中国药房，2013（45）：4298-4300.

[7]易文琳.HPLC法同时测定林可霉素利多卡因凝胶中2组分的含量[J].中国药房，2007，18（16）：1258-1259.